Spørgsmål:
Overlevelse af E. coli på agarplade ved -20 grader C uden glycerollager
Nivedita Singh
2012-09-18 21:19:01 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Hvis jeg holdt E. coli transformeret med plasmid ved -20˚C uden at fremstille glycerol, vil det overleve? Jeg har faktisk holdt det sådan i 18 timer. Hvad vil der ske med det? Vil det vokse i friske medier?

Mit gæt er, at du muligvis kan redde noget på dette tidspunkt, men det anbefales bestemt ikke til langtidsopbevaring. Hvis du ikke kan gendanne nogen levende celler, skal du stadig være i stand til at gendanne noget plasmid fra cellerne til retransformation.
e coli er hårde bugs. de holder i fryseren et stykke tid, men gode eksperimentelle overlader ikke ting som dette tilfældigt. De lever fint i et almindeligt køleskab i en uge eller mere - ikke nødvendigt at fryse. udskiftes og derefter overføres til glycerol så hurtigt som muligt.
To svar:
GWW
2012-09-18 22:33:45 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Over tid formoder jeg, at der dannes iskrystaller i kolonierne fra afrimningscyklusser i fryseren og fugtigheden i agaren. Dette vil medføre brud på bakteriemembranerne og kan med tiden ødelægge hovedparten af ​​bakteriecellerne. Pladerne tørres også over tid fra afrimningscyklussen i fryseren. Du kan muligvis efterlade dem i fryseren et stykke tid, men jeg kan ikke forudse, at de overlever på ubestemt tid.

Hvis stammerne er virkelig vigtige, anbefaler jeg bare at suge den op og bruge den lille tid, der er nødvendig for at fremstille glycerollageret. Glycerol anvendes i bakteriestammer som et kryobeskyttende middel for at forhindre krystallisering af stamopløsningen.

R Stephan
2012-09-19 13:29:09 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Trehalose [1], [2] er det kryobeskyttende middel, der bruges af bakterier til at holde tingene i gang, når alt andet fryser (eller tørrer op), og de vokser også i det!

Trehalose akkumuleres dramatisk i mikroorganismer under varmechok og osmotisk stress og hjælper med at beskytte celler mod termisk skade og iltradikaler. Her demonstrerer vi en vigtig rolle for dette sukker i koldtilpasning af bakterier.

  1. Kandror O, DeLeon A, Goldberg AL . 2002. Syntese af trehalose induceres ved eksponering af Escherichia coli for kulde og er afgørende for levedygtighed ved lave temperaturer. Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 99 (15): 9727-9732, doi: 10.1073 / pnas.142314099
  2. http://en.wikipedia.org/wiki / Trehalose


Denne spørgsmål og svar blev automatisk oversat fra det engelske sprog.Det originale indhold er tilgængeligt på stackexchange, som vi takker for den cc by-sa 3.0-licens, den distribueres under.
Loading...